Le 100 km s'élance en fin de journée et se court pour une large part de nuit, sur les routes et les chemins du Seeland bernois. Le terrain est roulant, l'ambiance celle d'une longue traversée collective où les coureurs se suivent à la lampe frontale.
Le 100 km de Bienne est le plus ancien 100 km d'Europe encore organisé, ce qui lui vaut un statut particulier dans le calendrier de l'ultra. Le même tracé peut aussi se courir en relais à cinq coureurs. Deux formats plus courts complètent le programme : un semi-marathon de 21,1 kilomètres et un 10 km nocturne. Les inscriptions ouvrent en novembre.